本文摘要：本篇文章是由《 中華醫學 》發表的一篇醫學論文，創刊于1995年，是由中華臨床醫學會主辦的臨床醫藥類專業學術期刊。在2000年10月被定為臨床醫藥類核心期刊。分別由我國著名的臨床專家執編，全國各優秀醫院院長及專家為顧問團，審稿嚴慎，因而期刊具有較高的
本篇文章是由《中華醫學》發表的一篇醫學論文，創刊于1995年，是由中華臨床醫學會主辦的臨床醫藥類專業學術期刊。在2000年10月被定為臨床醫藥類核心期刊。分別由我國著名的臨床專家執編，全國各優秀醫院院長及專家為顧問團，審稿嚴慎，因而期刊具有較高的實用性、指導性和權威性，是全國醫學界與社會各界互通通信息的重要渠道,是全國醫學界進行學術交流、切磋醫學經驗的重要平臺。
【摘要】 目的 探討睡眠剝奪(sleep deprivation，SD) 對大鼠神經內分泌功能變化的影響。方法 將60只Wistar雄性大鼠隨機分為6組(每組10只)：空白對照組(C組)、 AS對照組(AS組)、ASSD1天組(SD1d組)、ASSD3天組(SD3d組)、ASSD5天組(SD5d組)、ASSD7天組(SD7d組)。5組建立AS模型后，其中4組再建立，SD模型，分析各組大鼠心電圖變化、生理及行為改變，測定各組大鼠血清中促腎上腺皮質激素(adrenocorticotropic hormone，ACTH)及皮質醇(cortisol，CORT)的含量。結果 SD后AS大鼠精神狀態逐漸轉差，反應變遲鈍、變虛弱，隨著SD時間的延長，AS大鼠呈先興奮，然后激惹，最后衰竭的變化趨勢。隨著SD的時間延長，AS大鼠心率呈先增快后減慢的波動性變化。心電圖ST-T逐漸上抬，T波高聳直立。ACTH及CORT水平呈先增高后下降的波動性變化。結論 SD造成的應激性刺激，能夠激活HPA軸，從而引起AS大鼠神經內分泌功能發生變化。
【關鍵詞】 睡眠剝奪 動脈粥樣硬化 神經內分泌
睡眠剝奪(sleep deprivation，SD) 具體指人因環境或自身原因喪失了所需要睡眠量的一種過程和狀態。SD影響了機體固有的生物節律，使機體處于應激狀態。本研究以神經內分泌系統所產生的促腎上腺皮質激素(adrenocorticotropic hormone，ACTH)及皮質醇(cortisol，CORT)為切入點，通過測定其在大鼠血清中的表達量在不同SD時間情況下的波動情況，分析各組大鼠神經內分泌功能狀態，并結合各組大鼠心電圖變化、生理及行為改變來反映SD對大鼠神經內分泌功能變化的影響。
1材料與方法
1.1分組
60只Wistar雄性大鼠(由中山大學動物實驗中心提供)，體重(250±10
)g。隨機分為6組：空白對照組(C組)10只、大平臺對照組(A組)10只、ASSD1d組(SD1d組)10只、ASSD組3d組(SD3d組)10只、ASSD5d組(SD5d組)10只、ASSD7d組(SD7d組)10只。
1.2 建立大鼠AS 模型
參照文獻[1] 方法，50只大鼠在腹腔注射維生素D3 (60 萬u/ kg) 后，給予高脂飼料(3 %膽固醇，0. 5 %膽酸鈉，0. 2 %丙基硫氧嘧啶，5 %白糖，10 %豬油，81. 3 %基本飼料) 喂養8周可形成典型的AS 病變。
1.3 建立AS大鼠睡眠剝奪模型
以“改良多平臺水環境SD法”制備SD模型[2]。將4組大鼠，每組各放在一個裝有15個小平臺的水槽中飼養(主要是利用大鼠怕水及在水中無法進入睡眠的生活習性，通過在盛水的水槽中放置平臺，讓大鼠站立在平臺上，大鼠在平臺上可自由進食飲水，并可在平臺間自由活動。因平臺直徑足夠小(直徑6.5cm)，若其睡眠，會因全身肌張力降低引起節律性低頭、觸水或落入水中驚醒，來達到SD的目的)，以此建立起ASSD模型。SD1d組為持續SD1天，SD3d組為持續SD3天，SD5d組為持續SD5天，SD7d組為持續SD7天。為排除隔離及水環境造成的影響，將A組10只大鼠放置在大平臺上飼養，采用與SD組大小一樣的水箱，但在其底部放置的平臺大小為30cm×18cm×8cm，大鼠在平臺上有一定活動空間，可以自由睡眠，用以形成與SD各組相似的環境，其他環境與實驗組相同。C組采用正�；\養，自然晝夜光照，喂基礎飼料。實驗前1周將實驗所需大鼠放至一只籠中飼養，熟悉適應環境1周。
1.4 觀察各組大鼠生理及行為改變
觀察各組大鼠的精神狀態、反應能力以及行為表現的變化。
1.5 各組大鼠心電圖監測
將大鼠用20%烏拉坦0.8ml/kg注射麻醉，約5min待大鼠安靜后，在小動物實驗臺上仰臥固定大鼠。接通RM-6000多通道生理儀電源，打開機器，將針電極(注射器針頭連于電極)分別向心刺入大鼠四肢皮下，電極連線分為紅色(R)右上肢、黃色(L)左上肢、黑色(RF)右下肢、綠色(LF)左下肢。描記標準導聯II導聯體表心電圖并進行分析，記錄心率及ST段位移值。描記條件為：標準電壓：為20mm/mV，描記速度為50mm/s。通過觀察心電圖ST位移值(ST段位移值變化以QRS波群起點連線為基線，測量點取J點后0.02s)可反映心肌缺血程度。心電圖形及間期測量方法按徐叔云等[3]方法進行。
1.6 各組大鼠血清ACTH及CORT含量測定
各組大鼠在相應時間點用10%水合氯醛(0.3 m1/100 g體質量)大鼠腹腔注射麻醉，用毛細玻管眶內靜脈取血2 ml， EDTA抗凝，靜置0.5 h后4℃，3 000 r/min離心10 min，取血漿1 ml，保存在-70℃的冰箱中，以備待測ACTH和CORT的含量。用放射免疫分析法統一測定ACTH和CORT含量，按試劑盒說明書進行操作。ACTH及CORT試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.7 統計學方法
采用SPSS 13.0統計軟件，計數資料以 _ X±s表示，組間均數比較采用完全隨機設計單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。
2結果
2.1 各組大鼠生理及行為改變 SD后大鼠精神狀態逐漸轉差，反應變遲鈍，食欲不振，身體漸消瘦、變虛弱，皮毛變粗糙、蓬亂而沒有光澤。SD初期，大鼠精神亢奮，對聲音、氣味、光線等刺激的反應較敏捷。行為興奮性提高，較為活躍。到SD第3天時，SD3d組中所有大鼠出現磕睡、節律性垂頭現象，并常因鼻子浸入水中或掉入水中而驚醒。到SD第5天時，SD5d組中所有大鼠表現煩躁、易怒、相互之間喜撕咬、打斗。至SD第7天時，SD7d組中所有大鼠均表現為呼吸加快，精神萎靡，而對聲音、氣味、光線等刺激的敏感性下降。低頭駝背，蜷縮顫抖，不喜動，活動能力明顯減退。進食少，身體極度虛弱。
2.2 各組大鼠心率變化
SD后大鼠心率變化較大。SD剛開始時大鼠心率先是極度增快，于SD1d時心率最快達到最高值，與SD5d組及SD7d組相比較，差異具有統計學意義(P<0.001)。隨著SD時間的延長，心率逐漸減慢。
與C組比較，a p<0.01;與AS組比較，b p<0.01;與 SD1d組比較，c p<0.01;與SD3d組比較，d p<0.01;與SD5d組比較，e p<0.01。
2.3 各組大鼠心電圖ST-T改變
C組大鼠心電圖ST-T改變與SD3d組、SD5d組及SD7d組比較，差異均具有統計學意義(P<0.05)。A組與SD5d組及SD7d組比較，均有顯著性差異(P<0.001)。SD1d組與SD5d組及SD7d組比較，差異均具有統計學意義(P<0.001)。SD3d組與SD5d組及SD7d組間兩兩比較，均有顯著性差異(P<0.001)。隨著SD的時間延長，大鼠心電圖ST-T逐漸上抬，T波高聳直立。(見表2，圖1-6)
表2 各組大鼠心電圖ST-T改變( _ X±s)
2.4 大鼠血清ACTH含量變化
C組、A組、SD1d組三組之間相互兩兩比較無顯著性差異(P>0.05)。該三組分別與SD3d組、SD5d組、SD7d組間相互兩兩比較差異均有顯著性(P<0.001)。隨著SD時間的延長，大鼠血清ACTH含量，先呈現升高的趨勢，并在SD3d時大鼠血清ACTH含量達到最高值，與SD5d組、SD7d組間比較差異均具有統計學意義(P<0.001)。之后大鼠血清ACTH含量呈明顯的下降趨勢，至SD7d時，其ACTH含量最低，與SD5d組比較差異具有統計學意義(P<0.001)。(見表3)
表3 各組大鼠血清ACTH含量變化( _ X±s)
與C組比較， a p<0.01;與AS組比較，b p<0.01;與 SD1d組比較，c p<0.05，d p<0.01;與SD3d組比較，e p<0.01;與SD5d組比較，f p<0.01。
2.5 大鼠血清CORT含量變化
C組、A組、SD1d組、SD3d組、SD5d組及SD7d組間相互兩兩比較，均有顯著性差異(P<0.05)。隨著SD時間的延長，大鼠血清CORT含量先呈逐漸升高趨勢，至SD5d時達到最高值，CORT含量約為C組的2倍，之后降低。(見表4)
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